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HPLC測定沒食子中沒食子酸的含量
作者:赤誠生物            發布時間:2013-12-06

摘要:據國外外文獻記載,沒食子酸最早由舍勒制得。但古代中國早在這以前就有明確記載。明代李挺的《醫學入門》中記載了用發酵法從五倍子中得到沒食子酸的過程。

         目的建立沒食子中沒食子酸的含量測定方法。方法采用液相色譜法測定沒食子酸的含量,色譜柱為Waters Symme @Cl8柱(5μm,4。6 mm×150mm);流動相為甲醇一0。05%磷酸溶液(5:95);流速0。8 ml·min ;檢測波長273 Bill。結果沒食子酸進樣量在0。0506~0。4060μg范圍內線性關系良好,平均加樣回收率為98。99%,RSD:1。5%。結論所用方法簡便、快速、準確。

?         沒食子是由沒食子蜂的幼蟲寄生于沒食子樹幼枝上所產成的蟲癭。沒食子中含有鞣質和沒食子酸,為維吾爾醫生常用藥,具有收斂、抗炎、促進黏膜愈合的作用?,F參照文獻

J 采用HPLC測定沒食子中沒食子酸的含量。

1 實驗部分
1。1 儀器與試藥:高效液相色譜儀包括Waters Delta 6OO泵,waters 2996 PDA檢測器(美國Waters公司)。沒食子藥材(新疆維吾爾自治區藥品檢驗所鑒定);沒食子酸對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:0831—9501);甲醇(色譜純);磷酸(分析純);水為重蒸水。

1。2 色譜條件
色譜柱為Waters SymmetryCl8(5μm,4。6mm×150 mm);流動相為甲醇一0。05%磷酸溶液(5:95);檢測波長273nm;流速0。8 ml/min ;柱溫25℃。

1。3 方法與結果
1。3。1 溶液的制備:精密稱取沒食子粗粉1 g,置50 m1量瓶中,加甲醇30 m1,超聲提取1 h,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,精密吸取續濾液l m1,甲醇定容至l0 m1量瓶中,搖勻,作為供試品溶液。精密稱取干燥至恒重的沒食子酸對照品2。55mg,置50 m1量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,得對照品溶液。
 1。3。2 線性范圍的考察:精密吸取沒食子酸對照品溶液1。0、2。0、4。0、6。0、8。0 ml于5個l0 m1量瓶中,分別加甲醇至刻度,搖勻,各吸取l0 l注入高效液相色譜儀,以進樣量( g)為橫坐標,峰面積為縱坐標繪制標準曲線,回歸,得線性方程為:A=1。468×lO6C-1。 739×lO4(r=0。9997)。結果表明,沒食子酸在0。0506 0。4O60/_tg范圍內,具有良好的線性關系。
1。3。3 精密度試驗:在“1。2。1”項條件下,精密吸取沒食子酸對照品溶液10μl,連續進樣6次,峰面積的RSD=1。3% ,表明儀器精密度良好。
1。3。4 穩定性實驗:取室溫下放置的樣品溶液,在20 h內進樣6次,其峰面積的RSD=2。4%,表明樣品溶液在室溫下20 h穩定。
1。3。5 方法精密度(重復性)試驗:精密稱取沒食子藥材1 g,按“1。3。1”項下方法制備6份供試品溶液,分別測定沒食子酸的含量,RSD=3。8%,證明此方法精密度良好。
1。3。6 加樣回收率試驗:精密稱取已知含量的沒食子樣品細粉,分別加入沒食子酸對照品,按“1。 3。8”項下方法測定沒食子酸的含量,再計算回收率,結果見表1。
 1。3。7 樣品的測定:精密稱取沒食子藥材1 g,按“1。 3。1”項下方法制備供試品溶液,經微孔濾膜(0。45μm)過濾,取續濾液l0 l進樣,同時進l0μl對照品溶液,進樣5次,用峰面積按外標法計算,得沒食子酸的平均含量31。65 mg/g,RSD=0。98%(n=5)。

2 討論
沒食子中主要含有可水解的鞣質,加熱提取會水解成沒食子酸,因此,樣品選用超聲提取的方法。曾分別超聲0。5、1。0、1。5、2。0 h,結果顯示,1。0 h已經提取完全。文中方法用于沒食子中沒食子酸的含量測定,操作簡便,結果準確。

 (來源:中國化工儀器網)

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